产品货号:
JN0025
中文名称:
UltraTaq DNA聚合酶
英文名称:
UltraTaq DNA Polymerase
产品规格:
250U|1250U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是通过采用分子进化技术对普通Taq酶进行改造而获得的新型SuperTaq酶,是新一代的PCR聚合酶。该酶可以快速、高效的扩增≤6kb片段目的基因片段,模板可低至0.05ng,并且可以对平端PCR产物加A,在常规PCR和荧光定量PCR中有着很好的应用。
- 常规PCR鉴定;
- 小片段目标基因克隆;
- 基因组片段扩增;
- 平端PCR产物加A;
- 双脱氧法测序;
- 荧光定量PCR。
- 快速:SuperTaq酶扩增速度为普通Taq酶的4倍,72℃保温10~15秒可延伸1kb以上。
- 高效:以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增≤6kb片段;对于人基因组DNA等复杂模板,能有效扩增出3kb特定基因片段。
- 高灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段。在同样条件下对于基因组DNA的扩增显著优于Taq酶。
- 独特配方的5×Buffer:使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。
74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTPs的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个活性单位(U)。
组分 | 250U | 1250U |
UltraTaq DNA聚合酶(5U/μL) | 50μL | 50μL×5 |
5×SuperTaq Taq Buffer with Mg2+ | 1mL×2 | 1mL×10 |
dNTPs (10mM each) | 200μL | 200μL×5 |
保存:-20℃
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带。qPCR方法检测无核酸内、外切酶污染。
- 使用本试剂扩增得到的PCR产物3'端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。
- 扩增较长片段建议换用快速Pfu DNA聚合酶。
- 2mM Mg2+可以满足绝大多数PCR扩增,对于某些PCR,为了保证较好的扩增,可调节为2~4mM。
- 体系中加入推荐的酶量,可以满足大多数PCR扩增,对于某些PCR,为了得到较好的扩增,可适当增加酶量。
图1.50μL扩增体系,以50ng人基因组DNA为模板,对3kb片段扩增结果。
泳道M:1kb DNA Ladder Plus II;
泳道1,泳道2:扩增3kb片段结果。
- 常用反应体系(50μL):
注:Mg2+终浓度为2mM。成分 用量 5×SuperTaq Buffer with Mg2+ 10μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) dNTPs (10mM each) 1μL 模板 1~50ng(质粒)
10ng~1μg(基因组)UltraTaq DNA聚合酶(5U/μL) 0.25μL (1.25U) ddH2O 至50μL - 常用PCR反应程序:
- 当扩增片段<3K:
反应阶段 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 90s 1 变性 94℃ 20s 30 退火 50~60℃ 20s 延伸 72℃ 1kb/15s 终延伸 72℃ 5min 1 保温 4℃ - 1 - 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
反应阶段 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 5min 1 变性 94℃ 5s 30 退火/延伸 68℃ 1kb/15s 终延伸 72℃ 5min 1 保温 4℃ - 1
- 当扩增片段<3K:
相关搜索:UltraTaq DNA聚合酶,DNA聚合酶,Taq酶,UltraTaq DNA Polymerase